ਨਵਾਂ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ (SARS-Cov-2) ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਕਿੱਟ
New Cਓਰੋnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluਧਾਤੂscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】ਨਵਾਂ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ (SARS-Cov-2) ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਕਿੱਟ (ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ RT-PCR ਪੜਤਾਲ ਵਿਧੀ)
【Packaging specifications 】25 ਟੈਸਟ/ਕਿੱਟ
【Intended usਉਮਰ】
ਇਸ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨੈਸੋਫੈਰਨਜੀਲ ਸਵੈਬਜ਼, ਓਰੋਫੈਰਨਜੀਲ (ਗਲੇ) ਦੇ ਸਵੈਬਜ਼, ਐਨਟੀਰਿਅਰ ਨੇਸਲ ਸਵੈਬਜ਼, ਮਿਡ-ਟਰਬਿਨੇਟ ਸਵੈਬ, ਨੱਕ ਧੋਣ ਅਤੇ ਨਾਸਿਕ ਐਸਪੀਰੇਟਸ ਵਿੱਚ ਨਵੇਂ ਕੋਰੋਨਵਾਇਰਸ ਤੋਂ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਗੁਣਾਤਮਕ ਖੋਜ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ COVID19 ਦੁਆਰਾ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਸਿਹਤ ਦੇਖਭਾਲ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਨ ਦਾ ਸ਼ੱਕ ਹੈ। ਨਵੇਂ ਕੋਰੋਨਵਾਇਰਸ ਦੇ ORF1ab ਅਤੇ N ਜੀਨਾਂ ਦੀ ਖੋਜ ਨੂੰ ਨਵੇਂ ਕੋਰੋਨਵਾਇਰਸ ਸੰਕਰਮਣ ਦੇ ਸਹਾਇਕ ਨਿਦਾਨ ਅਤੇ ਮਹਾਂਮਾਰੀ ਵਿਗਿਆਨਿਕ ਨਿਗਰਾਨੀ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
【Principles of the procedure 】
ਇਹ ਕਿੱਟ ਖਾਸ TaqMan ਪੜਤਾਲਾਂ ਅਤੇ ਨਾਵਲ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ (SARS-Cov-2) ORF1ab ਅਤੇ N ਜੀਨ ਕ੍ਰਮ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ। ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਹੱਲ ਵਿੱਚ ਟੀਚਿਆਂ ਦੀ ਖਾਸ ਖੋਜ ਲਈ ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੜਤਾਲਾਂ ਦੇ 3 ਸੈੱਟ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੜਤਾਲਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਵਾਧੂ ਸੈੱਟ ਨੂੰ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਹਾਊਸਕੀਪਿੰਗ ਜੀਨਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਕਿੱਟ ਦੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਮਿਆਰੀ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਟੈਸਟ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਟਾਕ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੁਆਰਾ ਖਾਸ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਜਾਂਚ ਨੂੰ ਪਚਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਡੀਗਰੇਡ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਰਿਪੋਰਟਰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਮੂਹ ਅਤੇ ਬੁਝੇ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਸਮੂਹ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇ, ਤਾਂ ਜੋ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਨਿਗਰਾਨੀ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਇੱਕ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕੇ. ਸਿਗਨਲ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸੰਸ਼ੋਧਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੁਆਰਾ, ਜਾਂਚ ਦਾ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਇੱਕ ਸੈੱਟ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ ਮੁੱਲ-ਸੀਟੀ ਮੁੱਲ (ਸਾਈਕਲ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ) ਤੱਕ ਪਹੁੰਚਦਾ ਹੈ। ਕੋਈ ਟਾਰਗੇਟ ਐਂਪਲੀਕਨ ਨਾ ਹੋਣ ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ, ਪੜਤਾਲ ਦਾ ਰਿਪੋਰਟਰ ਸਮੂਹ ਬੁਝਾਉਣ ਵਾਲੇ ਸਮੂਹ ਦੇ ਨੇੜੇ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਸਮੇਂ, ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਰੈਜ਼ੋਨੈਂਸ ਊਰਜਾ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਰਿਪੋਰਟਰ ਸਮੂਹ ਦੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਨੂੰ ਬੁਝਾਉਣ ਵਾਲੇ ਸਮੂਹ ਦੁਆਰਾ ਬੁਝਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਪੀਸੀਆਰ ਯੰਤਰ ਦੁਆਰਾ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਸਿਗਨਲ ਦਾ ਪਤਾ ਨਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾ ਸਕੇ।
ਟੈਸਟ ਦੌਰਾਨ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਨ ਲਈ, ਕਿੱਟ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਨਾਲ ਲੈਸ ਹੈ: ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਿੱਚ ਟਾਰਗੇਟ ਸਾਈਟ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਪਲਾਜ਼ਮਿਡ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ ਹੈ, ਜੋ ਵਾਤਾਵਰਣ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਵੇਲੇ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਇੱਕ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਇੱਕ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸੈੱਟ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
【Main comਪੋਨੇਨts 】
Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | ਕੰਪੋਨents | |
ॐ ਨਮਃe | ਸਪੇਕification | ਕੁਆਂਟity | ਕੁਆਂਟity | |
ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ | 180 μL/ਸ਼ੀਸ਼ੀ | 1 | 1 | ਨਕਲੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਣਾਏ ਗਏ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ, ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ |
ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ | 180 μL/ਸ਼ੀਸ਼ੀ | 1 | 1 | ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ |
ਸਾਰਸ-ਕੋਵ-2 ਮਿਕਸ | 358.5 μL/ਸ਼ੀਸ਼ੀ | 1 | / | ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਜੋੜੇ, ਖਾਸ ਖੋਜ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੜਤਾਲਾਂ, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ, ਆਦਿ |
ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ | 16.5 μL/ਸ਼ੀਸ਼ੀ | 1 | / | ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮਜ਼, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ, ਯੂਐਨਜੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮਜ਼, ਆਦਿ। |
ਸਾਰਸ-ਕੋਵ-2 ਮਿਸ਼ਰਣ (ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ) | 25 ਟੈਸਟ / ਸ਼ੀਸ਼ੀ | / | 1 | ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਜੋੜੇ, ਖਾਸ ਖੋਜ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੜਤਾਲਾਂ, dNTPs, Taq ਐਨਜ਼ਾਈਮ, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ, ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ, ਆਦਿ। |
2x ਬਫਰ | 375 μL/ਸ਼ੀਸ਼ੀ | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ, ਆਦਿ। |
ਨੋਟ ਕਰੋ:(1) ਵੱਖ-ਵੱਖ ਬੈਚ ਕਿੱਟਾਂ ਦੇ ਭਾਗਾਂ ਨੂੰ ਮਿਲਾਇਆ ਜਾਂ ਬਦਲਿਆ ਨਹੀਂ ਜਾ ਸਕਦਾ।
(2) ਆਪਣਾ ਖੁਦ ਦਾ ਰੀਐਜੈਂਟ ਤਿਆਰ ਕਰੋ: ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਵਾਲੀ ਕਿੱਟ।
【Storage condਆਈ.ਟੀ.ਆਈons ਅਤੇ expiration date 】
For BST-SARS-25:ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ -20±5℃ 'ਤੇ ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟ ਅਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ।
For BST-SARS-DR-25:ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਆਵਾਜਾਈ. -20±5℃ 'ਤੇ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕਰੋ।
ਵਾਰ-ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਥੌਅ ਚੱਕਰਾਂ ਤੋਂ ਬਚੋ। ਵੈਧਤਾ ਦੀ ਮਿਆਦ ਅਸਥਾਈ ਤੌਰ 'ਤੇ 12 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਸੈੱਟ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।
ਨਿਰਮਾਣ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਮਿਤੀ ਲਈ ਲੇਬਲ ਦੇਖੋ।
ਪਹਿਲੀ ਵਾਰ ਖੁੱਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਰੀਐਜੈਂਟ ਨੂੰ -20±5 ° C 'ਤੇ 1 ਮਹੀਨੇ ਤੋਂ ਵੱਧ ਜਾਂ ਰੀਐਜੈਂਟ ਪੀਰੀਅਡ ਦੇ ਅੰਤ ਤੱਕ, ਜੋ ਵੀ ਤਾਰੀਖ ਪਹਿਲਾਂ ਆਉਂਦੀ ਹੈ, ਵਾਰ-ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਥੌਅ ਚੱਕਰਾਂ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ, ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। -ਥੌਅ ਚੱਕਰ 6 ਵਾਰ ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ ਹੋਣੇ ਚਾਹੀਦੇ।
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480।
【Sample requirements 】
1.Applicable ਨਮੂਨਾ ਕਿਸਮ: nucleic ਐਸਿਡ ਦਾ ਹੱਲ ਕੱਢਿਆ.
2. ਨਮੂਨਾ ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਆਵਾਜਾਈ: 6 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ -20±5℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ। ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ 6 ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਾਰ ਨਾ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕਰੋ ਅਤੇ ਪਿਘਲਾਓ।
【Tਅਨੁਮਾਨing method】
1.Nucleic acid extraction
ਵਾਇਰਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਲਈ ਇੱਕ ਢੁਕਵੀਂ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਚੁਣੋ, ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਕਿੱਟ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰੋ। ਯਿਕਸਿਨ ਬਾਇਓ-ਟੈਕ (ਗੁਆਂਗਜ਼ੂ) ਕੰਪਨੀ, ਲਿਮਟਿਡ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਮਿਤ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
2. Reaction ਰੀਜnt prepਆਰਾtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 ਮਿਕਸ ਅਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ ਨੂੰ ਹਟਾਓ, ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪਿਘਲਾ ਦਿਓ, Vortex ਡਿਵਾਈਸ ਦੁਆਰਾ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ ਅਤੇ ਫਿਰ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।
(2) 16.5uL ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ ਨੂੰ 358.5uL ਸਾਰਸ-ਕੋਵ-2 ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਮਿਸ਼ਰਤ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਹੱਲ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ।
(3) ਇੱਕ ਸਾਫ਼ 0.2 ਮਿ.ਲੀ. ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ. ਆਕਟਲ ਟਿਊਬ ਤਿਆਰ ਕਰੋ ਅਤੇ ਉੱਪਰ ਦਿੱਤੇ ਮਿਸ਼ਰਤ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਘੋਲ ਦੇ 15uL ਪ੍ਰਤੀ ਖੂਹ ਨਾਲ ਮਾਰਕ ਕਰੋ।
(4) 15 μL ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਘੋਲ, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਆਕਟਲ ਟਿਊਬ ਕੈਪ ਨੂੰ ਢੱਕੋ।
(5) ਉਲਟਾ ਉਲਟਾ ਕੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ, ਅਤੇ ਟਿਊਬ ਦੇ ਤਲ 'ਤੇ ਤਰਲ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ SARS-Cov-2 ਮਿਕਸ((Lyophilised) ਵਿੱਚ 375ul 2x ਬਫਰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ। ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ ਅਤੇ ਫਿਰ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ। ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਸਟੋਰੇਜ।)
(2) ਇੱਕ ਸਾਫ਼ 0.2 ਮਿ.ਲੀ. ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ. ਆਕਟਲ ਟਿਊਬ ਤਿਆਰ ਕਰੋ ਅਤੇ ਇਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀ ਖੂਹ ਪ੍ਰਤੀ 15μL ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਚਿੰਨ੍ਹਿਤ ਕਰੋ।
(3) 15μL ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਘੋਲ, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਆਕਟਲ ਟਿਊਬ ਕੈਪ ਨੂੰ ਢੱਕੋ।
(4) ਉਲਟਾ ਉਲਟਾ ਕੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ, ਅਤੇ ਟਿਊਬ ਦੇ ਤਲ 'ਤੇ ਤਰਲ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।
3. ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ amplification (ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਲਈ ਇੰਸਟ੍ਰੂਮੈਂਟ ਮੈਨੂਅਲ ਵੇਖੋ।)
3. 1 ਪੀਸੀਆਰ 8-ਟਿਊਬ ਨੂੰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੀਸੀਆਰ ਯੰਤਰ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ, ਅਤੇ ਲੋਡ ਕਰਨ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਅਨੁਸਾਰ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸੈੱਟ ਕਰੋ।
3.2 ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਖੋਜ ਚੈਨਲ:
(1) ORF1ab ਜੀਨ FAM (ਰਿਪੋਰਟਰ: FAM, Quencher: None) ਦੇ ਖੋਜ ਚੈਨਲ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਦਾ ਹੈ।
(2) N ਜੀਨ VIC (ਰਿਪੋਰਟਰ: VIC, Quencher: None) ਦੇ ਖੋਜ ਚੈਨਲ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਦਾ ਹੈ।
(3) ਅੰਦਰੂਨੀ ਮਿਆਰੀ ਜੀਨ CY5 (ਰਿਪੋਰਟਰ: CY5, Quencher: None) ਦੇ ਖੋਜ ਚੈਨਲ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਦਾ ਹੈ।
(4) ਪੈਸਿਵ ਰੈਫਰੈਂਸ ਨੂੰ ROX 'ਤੇ ਸੈੱਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
3.3 PCR ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਪੈਰਾਮੀਟਰ ਸੈਟਿੰਗ:
ਕਦਮ | ਤਾਪਮਾਨ (℃) | ਸਮਾਂ | ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਸੰਖਿਆ | |
1 | ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ | 50 | 15 ਮਿੰਟ | 1 |
2 | Taq ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ | 95 | 2.5 ਮਿੰਟ | 1 |
3 | Taq ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ | 93 | 10 ਐੱਸ | 43 |
ਐਨੀਲਿੰਗ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਪ੍ਰਾਪਤੀ | 55 | 30 ਐੱਸ |
ਸੈੱਟ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਫਾਈਲ ਨੂੰ ਸੇਵ ਕਰੋ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਚਲਾਓ..
4.Results analysis
ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਦੇ ਖਤਮ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਤੀਜੇ ਆਪਣੇ ਆਪ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਇੰਸਟਰੂਮੈਂਟ ਡਿਫੌਲਟ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ 'ਤੇ ਸੈੱਟ ਹੈ।
【Explanation of test results 】
1. ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੀ ਵੈਧਤਾ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਓ: ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ FAM, VIC ਚੈਨਲ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਆਮ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ Ct ਮੁੱਲ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 34 ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਯੰਤਰਾਂ ਦੀਆਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਕਾਰਨ ਉਤਰਾਅ-ਚੜ੍ਹਾਅ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੰਟਰੋਲ FAM, VIC ਚੈਨਲ ਗੈਰ-ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ Ct ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਸਹਿਮਤੀ ਹੈ ਕਿ ਉਪਰੋਕਤ ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਉਸੇ ਸਮੇਂ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਟੈਸਟ ਅਵੈਧ ਹੈ।
2. ਨਤੀਜਾ ਨਿਰਣਾ
FAM/VIC ਚੈਨਲ | ਨਿਰਣੇ ਦਾ ਨਤੀਜਾ |
ਸੀਟੀ-37 | ਸੈਂਪਲ ਟੈਸਟ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ |
37≤Ct<40 | ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਐਸ-ਆਕਾਰ ਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਸ਼ੱਕੀ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਦੁਬਾਰਾ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ; ਜੇਕਰ ਮੁੜ-ਪ੍ਰੀਖਿਆ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਇਕਸਾਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਇਸ ਨੂੰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੁੰਦਾ ਹੈ |
Ct≥40 ਜਾਂ ਕੋਈ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਨਹੀਂ | ਨਮੂਨਾ ਟੈਸਟ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ (ਜਾਂ ਕਿੱਟ ਖੋਜ ਦੀ ਹੇਠਲੀ ਸੀਮਾ ਤੋਂ ਹੇਠਾਂ) |
ਨੋਟ: (1) ਜੇਕਰ FAM ਚੈਨਲ ਅਤੇ VIC ਚੈਨਲ ਦੋਵੇਂ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹਨ, ਤਾਂ SARS-Cov-2 ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੋਣ ਲਈ ਨਿਸ਼ਚਿਤ ਹੈ।
(2) ਜੇਕਰ FAM ਚੈਨਲ ਜਾਂ VIC ਚੈਨਲ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ ਅਤੇ ਦੂਜਾ ਚੈਨਲ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਤਾਂ ਟੈਸਟ ਨੂੰ ਦੁਹਰਾਇਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਜੇਕਰ ਇਹ ਉਸੇ ਸਮੇਂ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ SARS-Cov-2 ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਵੇਗਾ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ SARS-Cov-2 ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਵੇਗਾ।